消毒（滅菌）時，除了應注意消毒方法本身的性質和特點外，還要注意使用方法和外界因素對消毒效果的影響。不論使用哪種毒方法，其消毒效果都會受多方面因素的影響，對這些因素的掌握和加以利用，能提高其消毒效果。主要影響因素有以下幾個方面。

●消毒的劑量

消毒劑量是殺滅微生物的基本條件，它包括消毒強度和時間兩方面。消毒強度在熱力消毒時是指溫度高低，在化學消毒時是指物濃度，在紫外線消毒時是指紫外線照射強度。一般來說，增加消毒處理強度能相應提高消毒（殺菌）的速度；而減少消毒作用時間也會使消毒效果降低。

●微生物污染的種類和數(shù)量

生物的種類不同，對其消毒的效果自然不同。微生物的數(shù)量的多少也會影響消毒效果。所以在消毒前要考慮到微生物污染的種類和數(shù)量。

●溫度的影響

除熱力消毒完全依靠溫度作用來殺滅微生物外，其他各種消毒方法亦都受溫度變化的影響。無論在物理消毒還是化消毒劑，溫度越高效果越好。

●濕度的影響

消毒環(huán)境的相對濕度對氣體消毒和熏蒸消毒的影響十分明顯，濕度過高或過低都會影響消毒效果，甚至導致消毒失敗。室內空氣甲醛熏蒸消毒的相對濕度應為 80--90%，小型環(huán)氧乙烷消毒處理的相對濕度以 40--60% 為宜，大型消毒（>0.15立方米）為 50%--80%。另外紫外線在相對濕度為 60% 以下殺菌力較強。

●酸堿度（PH值）的影響

酸堿度的變化可直接影響某些消毒方法的效果。PH值既可對消毒劑本身影響，又可對微生物影響。如戊二醛在PH值由 3 升至 8 時，殺菌作用逐步增強；而次氯酸鹽溶液在PH值由 3 升至 8 時，殺菌作用卻逐漸下降；洗必泰、季銨鹽類化合物在堿性環(huán)境中殺菌作用較大。

●有機物質的影響

消毒環(huán)境中的有機物質往往能抑制或減弱消毒因子的殺菌能力，特別是化學消毒劑的殺菌能力。各種消毒劑受有機物的影響不盡相同，如在有機物存在時，含氯消毒劑的殺菌作用顯著下降；季銨鹽類、雙胍類和過氧化合物類的消毒作用受有機物的影響也很明顯；但環(huán)氧乙烷、戊二醛等消毒劑受有機物的影響比較小。如果有機物存在，消毒劑量則應加大。

●拮抗物質的影響

拮抗物質對化學消毒劑會產(chǎn)生中和與干擾作用。如：季銨鹽類消毒劑的作用會被肥皂或陰離子的洗滌劑所中和；酸性或堿性的消毒劑會被堿性或酸性的物質所中和，減弱其消毒作用。

●穿透作用的影響

物品被消毒時，殺菌因子必須直接作用到微生物本身才能起殺菌作用。不同消毒因子穿透力不同，如干熱消毒比濕熱穿透力差，甲醛蒸汽消毒比環(huán)氧乙烷穿透力差，紫外線消毒只能作用于物體表面和淺層液體中的微生物。